原代细胞如何取材，这些你都会吗？

时间：2023-11-10 15:33:30 来源： 点击量：1138

主要取自于手术过程中的皮片，方法似外科取断层皮片手术操作，但面积一般2~4c㎡。 　　内脏和实体瘤的取材 　　内脏除消化道外基本是无菌的，但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位，实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域，要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。 　　血液细胞的取材 　　血细胞、淋巴细胞的取材，一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中（如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等）分离细胞，取材时应注意抗凝。 　　骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材 　　严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁PBS洗两次，再用培养液洗一次后即可培养，不宜低温存放。 　　动物组织取材 　　鼠胚组织取材 　　首先用引颈或气管窒息致死法处死孕期合适的动物，然后将其整个浸泡在含有75%酒精的烧杯中，5min后（注意时间不能太长，以避免酒精从口或其他通道进入体内，影响组织活力），取出动物，在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢，切开皮肤，用无菌操作法解剖取胚或用无菌止血钳挟起皮肤、用无菌眼科剪沿躯干中部环形剪开皮肤，用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾，把动物反包，暴露躯干，然后再固定，更换无菌解剖器材，采用无菌操作法解剖取出胚胎。 　　幼鼠胚肾（或肺）取材 　　幼鼠采用上述方法处死消毒后，腹部朝上固定在木板上，先切开游离毛皮并拉开至两侧：然后采用无菌法打开胸腔取肺，或背部朝上固定在木板上，先将背部毛皮切开游离并拉向两侧，然后采用无菌法从背部打开腹腔取肾。 　　人胚体组织取材 　　取材方法与鼠类相同 　　鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材步骤 　　（1）取孵化至适当胚龄（9~12天）的胚蛋，用照蛋灯在暗处灯检，若有丰富血管、胚体有运动的胚蛋，说明胚体发育良好，并用有色笔划出气室和胚ti位置。 　　（2）将胚蛋置于蛋架上，先用温水清洗蛋壳，再用75%酒精棉球擦干； 　　（3）经碘酒、75%酒精消毒后，在无菌条件下采用无菌法用剪刀或中号镊子打开气室，沿气室边缘去除蛋壳； 　　（4）用眼科镊撕去壳膜，暴露出鸡胚； 　　（5）用弯头镊轻挑起胚头，取出胚胎，放入无菌平皿中，解剖取材。